医学生物化学与分子生物学实验技术双语教程【2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载】

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第1章 概论1

第一节 常用生物化学与分子生物学实验方法1

一、分光光度法1

二、层析2

三、电泳4

四、离心法7

五、核酸扩增8

六、分子杂交10

第二节 常用生物化学与分子生物学仪器设备的基本操作12

一、分光光度计12

二、离心机13

三、仪器的清洗及干燥14

四、吸量管和微量移液器15

五、试剂混匀方法16

六、保温17

七、过滤17

八、烘箱和恒温箱17

第三节 实验样品的制备17

一、血液样品的制备17

二、尿液样品的制备18

三、组织样品的制备18

附录A 实验室规则19

附录B 实验记录及实验报告19

附录C 实验室用水的种类和标准20

一、实验室用水的种类20

二、评价实验室用水质量的常用指标20

第2章 蛋白质的分离、纯化、定量与鉴定22

总论22

一、蛋白质分离纯化的原则和策略22

二、蛋白质分离纯化的方法22

三、蛋白质的定量和定性分析24

四、蛋白质的鉴定25

实验1 蛋白质的分离纯化26

实验1-1 盐析法分离血浆白蛋白26

实验1-2 分子筛层析（凝胶过滤）28

实验1-3 亲和层析纯化胰蛋白酶31

实验1-4 离子交换层析36

实验1-5 醋酸纤维薄膜电泳分离血浆蛋白40

实验1-6 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血浆蛋白43

实验2 蛋白质定量47

实验2-1 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量47

实验2-2 双缩脲法测定蛋白质含量49

实验2-3 Folin-酚试剂法（Lowry法）52

实验2-4 紫外分光光度法55

实验3 蛋白质鉴定——蛋白质印迹法58

第3章 酶学实验62

总论62

一、酶的提取、分离纯化62

二、酶活力测定63

实验4 影响酶促反应速度的因素64

实验4-1 pH对酶活性的影响64

实验4-2 温度对酶活性的影响67

实验4-3 激动剂和抑制剂对酶活性的影响69

实验5 米氏常数的测定72

实验5-1 酸性磷酸酶的提取及Km测定72

实验5-2 碱性磷酸酶的提取及Km测定75

实验6 血清淀粉酶活性的测定79

第4章 物质代谢82

总论82

实验7 血糖浓度的测定82

实验7-1 邻甲苯胺法测定血糖浓度82

实验7-2 葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度85

实验8 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳89

实验9 转氨基作用（纸层析法）92

实验10 血尿素氮测定96

第5章 核酸的分离、纯化、定量与鉴定100

总论100

一、核酸的分离、提取和纯化100

二、核酸的定量102

三、核酸的保存102

实验11 核酸提取103

实验11-1 血液基因组DNA的提取103

实验11-2 大鼠肝脏RNA的提取104

实验12 基因扩增107

实验12-1 应用PCR技术扩增血红蛋白β基因107

实验12-2 从总RNA中采用反转录PCR扩增GAPDH110

实验13 核酸凝胶电泳113

实验13-1 核酸琼脂糖凝胶电泳113

实验13-2 聚丙烯酰胺凝胶电泳115

实验14 核酸杂交120

实验14-1 Southern印迹杂交120

实验14-2 Northern印迹杂交126

第6章 基因工程131

总论131

一、基因工程的概念131

二、基因工程的基本要素131

三、基因工程的基本流程133

四、基因工程的支撑技术135

实验15 大肠杆菌的培养及感受态细胞的制备136

实验16 质粒提取139

实验16-1 碱裂解法小量提取质粒DNA139

实验16-2 碱裂解法大量提取质粒DNA143

实验17 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA146

实验18 DNA的琼脂糖凝胶电泳回收149

实验19 目的基因与载体的连接152

实验20 电转化法制备感受态细胞154

实验21 转化子的鉴定156

实验22 质粒DNA的酶切鉴定158

第7章 特色创新实验162

实验23 异常血红蛋白的筛查162

实验24 血红蛋白电泳释放实验166